A antrona é uma cetona aromática tricíclica que é utilizada como reagente para a quantificação de carbohidratos. Em condições ácidas, esta reage com açúcares, formando um complexo com cor.
Representação esquemática do teste de quantificação de carbohidratos da antrona
Princípio
Primeiro, os carbohidratos são hidrolisados por tratamento com um ácido mineral (normalmente ácido sulfúrico), originando furfurais e hidroximetilfurfural (HMF). Estes furfurais são depois condensados pela antrona, formando um complexo com cor verde-azulada. A intensidade da cor deste complexo é proporcional à concentração de carbohidratos e pode ser medida por espectrofotometricamente a 620-630 nanómetros. A concentração dos carbohidratos pode então ser determinada utilizando diluições de um padrão de glucose com concentrações conhecidas para estabelecer uma curva de calibração.
Reagentes
- Solução de antrona, preparada dissolvendo 200 mg de antrona em 100 mL de ácido sulfúrico concentrado
- Solução padrão de glucose a 100 mg L-1 (utilizar balão volumétrico)
Procedimento
- Preparar diluições da solução padrão de glucose com concentrações conhecidas e transferir 1mL para tubos de ensaio;
- Preparar branco num tubo de ensaio, adicionando 1 mL de água;
- Transferir 1 mL da amostra para um tubo de ensaio;
- Adicionar 4 mL de solução de antrona a todos os tubos;
- Ferver amostras num banho de água em ebulição por 10 minutos;
- Arrefecer imediatamente as soluções (a cor das soluções deverá mudar para verde-azulado);
- Medir a absorvância a 630 nm das diluições da solução padrão e traçar recta de correlação A630nm = f([glucose]);
- Medir absorvância da amostra e determinar a sua concentração com base na recta previamente estabelecida.
Fontes: All Medical Stuff | Wikipédia