Estrutura proteica da FLAG-tag (Asp = ácido aspártico; Tyr = tirosina; Lys = lisina)
FLAG-tag (também conhecido como péptido ou epítopo FLAG) é um polipéptido usado como marcador de proteínas recombinantes em técnicas de engenharia genética e manipulação de DNA. É composto por oito aminoácidos, tem um peso molecular de 1012 Dalton e a sua sequência peptídica, da região N-terminal à região C-terminal, é DYKDDDDK (em que D = ácido aspártico, Y – tirosina e K = lisina). Podendo ser fundido tanto a N- como a C-terminal de uma proteína, este motivo peptídico tem sido bastante utilizado na purificação de proteínas e complexos com múltiplas subunidades, por cromatografia de afinidade e na identificação e monitorização de proteínas, através de ensaios de reconhecimento por acção de um anticorpo. Esta segunda aplicação é de grande importância para os casos em que não existem anticorpos específicos para as proteínas em estudo. Este epítopo pode ainda ser usado em tandem (e.g. 3x FLAG), ou em conjunto com outras tags, como a tag de poli-histidina (His-tag).
Fontes: Wikipédia | Sigma Aldrich | Youtube – Audiopedia