O reagente de Dragendorff é usado em testes colorimétricos para a detecção de alcalóides, compostos azotados heterocíclicos e aminas terciárias numa determinada amostra. Na presença destes compostos, dá-se a formação de precipitados alaranjados, cuja cor varia de acordo com o tipo de composto (desde amarelo a vermelho acastanhado).
O reagente de Dragendorff trata-se de uma solução de iodeto de bismuto e potássio. O nitrato de bismuto reage com iodeto de potássio em solução ácida (normalmente através do uso de ácido acético ou ácido tartárico) e forma um sal com cor laranja – K[BiI4].
Bi(NO3)3 + 4 KI → K[BiI4] + 3 KNO3
A detecção é feita por simples adição do reagente de Dragendorff à amostra. Em condições ácidas, as aminas terciárias ficam no seu estado protonado e a adição do reagente leva à formação de um precipitado corado, entre [BiI4]– e [HNR3]+. O sal precipita, permitindo a detecção destes compostos. No entanto, caso as concentrações de aminas terciárias e quaternárias for muito baixa, não se observa a formação do precipitado, podendo interferir com a interpretação do resultado.
Esta técnica pode também ser aplicada sobre placas de cromatografia em camada fina (TLC).
Preparação do reagente
Dissolve-se 0,5 g de nitrato de bismuto (III) – Bi(NO3)3 – em 10 mL de água destilada. A mistura deverá assemelhar-se a uma suspensão. Adiciona-se 10 mL de ácido clorídrico concentrado e agita-se.Num outro recipiente, dissolver 4 g de iodeto de potássio – KI – num pequeno volume de água destilada, o suficiente para que o sal se dissolva completamente.
Misturam-se as duas soluções. Deverá poder observar-se a formação de uma solução com uma cor laranja escura. A solução obtida pode então ser usada para o teste colorimétrico.
Alternativamente, adicionar 5,2 g de carbonato de bismuto – (BiO)2CO3 – e 4 g de iodeto de sódio – NaI – a 50 mL de ácido acético glacial e levar à ebulição por alguns minutos. Depois 12 horas de repouso, filtra-se a solução com um funil de vidro sinterizado, para remover os cristais de acetato de sódio que precipitaram. Mistura-se 40 mL da solução vermelho-escura límpida com 160 mL de acetato de etilo e 1 mL de água e armazena-se num frasco de vidro escuro. Para realizar-se o teste, 10 mL desta solução stock devem ser misturados com 20 mL de ácido acético e perfazer-se o volume da solução com água até 100 mL.
Quantificação de aminas quaternárias
Adiciona-se o reagent de Dragendorff às amostras. Centrifugam-se as misturas a 7000 x g por 1 minuto e remove-se o sobrenadante. O sobrenadante deve ser completamente removido, já que o nitrato de bismuto que possa permanecer em solução pode influenciar as medições no espectrofotómetro.
Dissolve-se o precipitado em 1 mL de uma solução aquosa de iodeto de sódio 2,45 mol.dm-3; adiciona-se uma alíquota de 10 µL da mistura anterior a 1 mL de uma solução aquosa de iotedo de sódio 0,49 mol.dm-3. Mede-se a absorvância a 467 nm, usando como branco a solução de iodeto de sódio 0,49 M.
Fontes: Wikipédia | MELscience | ReaserchGate
Raaman, 2006. Phytochemical Techniques. In Qualitative Phytoquemical Screening, New India Publishing: pp. 19, 20.
David K. Stumpf (1984) Quantitation and Purification of Quaternary Ammonium Compounds From Halophyte Tissue. Plant Physiol. 75: 273-274.
A COMPARATIVE PHYTOCHEMICAL ANALYSIS OF TOBACCO AND ITS NATURAL EXTRACTAN ECCENTRIC APPROACH